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Radikalenbildung begünstigen Siesjö, 1992b ; . Hinzu kommt, dass Kalzium als wichtiger Modulator der Proteinsynthese fungiert Wieloch et al., 1992 ; und so steigende Kalziumkonzentration eine Beeinflussung des Genoms verursachen Berridge, 1984 ; . Ist die Blutversorgung wieder hergestellt, entstehen freie Sauerstoffradikale Siesjö et al., 1992 ; , die als Hauptverursacher der neuronalen Degeneration während der Reperfusion angesehen werden Halliwell, 1992; Siesjö, 1992b; Grace, 1994; Phillis et al., 1994 ; . Freie Radikale werden von vielen Zellen auch unter physiologischen Bedingungen gebildet Mikroglia, Monozyten und Makrophagen ; Halliwell, 1992 ; , da sie unter kontrollierten Bedingungen eine entscheidende Rolle in der Abwehr von Bakterien, bei der intrazellulären Kommunikation und in der Regulation von Wachstumsprozessen Halliwell und Gutteridge, 1986 ; spielen. Unter der Ischämie können Kettenreaktionen, wie z.B. die Peroxidation von ungesättigten Fettsäuren, in Gang gesetzt werden Siesjö, 1981; McCord, 1985 ; . Es kommt zu einer Peroxidation von Membranlipiden, was zu einer erhöhten Membranliquidität führt, die wiederum die Kalziumpermeabilität erhöht und Membranproteine entkoppelt Halliwell, 1992; Siesjö, 1992b; Phillis, 1994 ; . Ebenfalls kommt es zu einer DNA-Schädigung Freeman und Crapo, 1982; Halliwell, 1992 ; , einer gesteigerten Glutamatausschüttung PellegriniGiampietro et al., 1990 ; , und zu einer Inhibition der Glutamatwiederaufnahme in die Gliazellen Volterra et al., 1994 ; . Die einzelnen Prozesse laufen im Bereich von Minuten bis Stunden nach Beginn der Ischämie ab und verstärken sich gegenseitig. Bereits wenige Stunden nach Beginn der Ischämie entwickelt sich eine entzündliche Reaktion mit Einwanderung von Leukozyten und einer Aktivierung von Mikro- Morioka et al., 1993; Gehrman et al., 1992 ; als auch Astroglia Hjelmeland und Harvey, 1988 ; mit einer Sekretion von potentiell zytotoxischen Substanzen Arvin et al., 1996 ; die mehrere Tage anhält. So ist bereits nach mehreren Stunden ein deutlicher Konzentrationsanstieg von IL-1b und TNFa zu beobachten Saito et al., 1996; Honda, 1996 ; . Diese Zytokine können einerseits den neuronalen Zellschaden verstärken Lachman et al., 1987; Quagliarello et al., 1991 ; , andererseits aber auch durch die Aktivierung von Wachstumsfaktoren neuroprotektiv wirken Spranger et al., 1990 ; . In jüngster Zeit hat sich in den Tiermodellen der zerebralen Ischämie gezeigt, dass Tage bis Wochen nach Ischämie ein Teil der Neurone nicht durch Nekrose, sondern durch Apoptose zugrunde geht Li et al., 1995; Nitatori et al., 1995; Schmidt-Kastner et al., 1997 ; . Dieses Phänomen des programmierten Zelltods geht einher mit einer endogenen Aktivierung von Proteasen, welche die DNA spalten und so den neuronalen Zelltod mit sich bringen.
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Zunächst wurde die Sensitivität der Zellkulturen auf extern zugefügtes GABA überprüft. Um die Veränderungen der Netzwerkaktivität zu visualisieren, wurden die von mehreren Elektroden gemessenen Spikefolgen für die Kontrollsituation und nach Applikation verschiedener GABA-Konzentrationen erstellt s. Abb. 3.8 A, B und C ; . Dabei wurden Ereignisse, deren Amplitude einen definierten Schwellenwert überschritt, als Spike detektiert und zum Zeitpunkt ihres Auftretens dargestellt. Die Spikeform sowie die Amplitude wurden vernachlässigt. Bei einer solchen Darstellung der detektierten Spikes spricht man auch von Rasterplot. Jeder einzelne Strich im Rasterplot repräsentiert einen Spike. Dickere Balken stellen mehrere Spike-Ereignisse mit einer hohen Frequenz und somit Bursts dar. Die Darstellung der Spikefolgen mehrerer Elektroden im Rasterplot zeigt, dass Bursts stets von einem Großteil der Elektroden synchron detektiert wurden s. Abb. 3.8 A, B und C ; . Mit steigender GABA-Konzentration nahm die Anzahl der Burst-Ereignisse ab. Während in der Kontrollsituation bei der dargestellten Messung in einer Minute 5 Bursts auftraten, sank.
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In Italien wurde im September 2001 ein Festpreissystem eingeführt. Der Festpreis wird zurzeit als der regional niedrigste Preis innerhalb einer Medikamentengruppe definiert. Seit Januar 2004 trifft eine neue staatliche Einrichtung, die nationale Arzneimittelbehörde AIFA ; , zentral alle Entscheidungen über Medikamentenzulassungen, Preise, Erstattungsbeträge und Arzneimittelausgaben im Allgemeinen. Die Behörde ist befugt, jedes Jahr die Liste der erstattungsfähigen Medikamente zu überarbeiten und die Änderungen, die sie für notwendig erachtet, vorzunehmen. Im Juni 2004 hat sie für alle erstattungsfähigen Medikamente eine Senkung der Herstellerpreise um 6, 8 % verfügt, was einer Senkung des erstatteten Verbraucherpreises um 4, 12 und theophylline.
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51 ; B65H 1 26 84 ; 08.02.2006 51 ; B65H 3 08 84 ; 08.03.2006 51 ; E03F 5 02 84 ; 28.03.2006.
Schwangerschaft
Eine drastische Verkleinerung bewirkt. Leider gibt es kein einheitliches Verhalten des EOFs bei Zusatz von organischen Lösungsmittel zum Puffer, der Einfluss muss individuell ermittelt werden[6].
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LightCycler-Gerät entwickelt, mit der man in kurzer Zeit stx1, stx2 und stx2e nachweisen kann [Bellin et al., 2001]. Ein weiteres molekulargenetisches Verfahren ist die KolonieblotHybridisierung. Bei einem positivem Toxinnachweis sollte zur Ergebnisbestätigung der Erreger isoliert werden, das Isolat charakterisiert und erneut auf Stx getestet werden [Bundesgesundheitsblatt 1997]. Da insbesondere bei HUS-Patienten der direkte EHEC-Nachweis aus Stuhlproben unsicher ist, sollte bei diesen Patienten eine zusätzliche Untersuchung auf LPS-Antikörper gegen EHEC im Serum erfolgen [Chart et al., 1991; Epidemiol. Bull., 1999]. Die bei HUSPatienten regelmäßig gefundenen LPS-Antikörper können im Hämagglutinationstest HAT ; , im Immunoblot und mittlerweile auch in Speichel [Ludwig et al., 2002] nachgewiesen werden. Erschwerend hierbei ist die hohe Anzahl verschiedener EHEC-Serotypen. Die Serodiagnostik in bezug auf Stx-Antikörper liefert keine verläßlichen Angaben [Chart et al., 1999]. In menschlichen Seren wurde eine unspezifische Stx-neutralisierende Aktivität gefunden, die nicht auf Immunoglobuline zurückzuführen war. Es zeigte sich, daß Seren von HUS-Patienten und der Kontrollgruppe nicht zu unterscheiden waren. Mögliche Erklärunge für dieses Phänomen könnte die extrem hohe Toxizität von Stx sein: Die Mengen von freiem Toxin sind wahrscheinlich zu gering, um eine Immunantwort hervorrufen zu können. Auch bindet Stx schnell an Endothelzellen [Tesh et al., 1991], so daß die Stx-Menge in der Zirkulation zu gering für eine immunologische Erkennung sein könnte. Eine weitere Erklärung ist die zytotoxische Wirkung auf B-Lymphozyten [Cohen et al., 1990]. Nur wiederholte Kontakte mit Stx scheinen zu einem deutlichen Titeranstieg zu führen. Eine Stx2Antikörper-Antwort wurde sowohl bei HUS-Patienten wie auch bei Kontrollgruppen häufiger als eine Antwort auf Stx1 beobachtet [Ludwig et al., 2001]. Präventiv ist allgemein zu umsichtiger Lebensmittel- und Personenhygiene zu raten. Angesichts der hohen Durchseuchung der Rinderbestände ist vor dem Verzehr roher oder unzureichend hitzebehandelter Milch- und Fleischprodukte zu warnen. Kleinkinder sollten bei Tierkontakten, insbesondere bei Rindern, Ziegen und Schafen beaufsichtigt werden und sich anschließend gründlich die Hände waschen. Seit 1997 ist es in der Milchverordnung gesetzlich verboten, unpasteurisierte Milch und Vorzugsmilch an Gemeinschaftseinrichtungen zu liefern. EHEC-Patienten sind nach 34 des Infektionsschutzgesetzes IfsG ; von der Öffentlichkeit abzusondern. EHEC-ausscheidende Personen gelten wegen der geringen Infektionsdosen als hochkontagiös und müssen besondere Hygienemaßregeln treffen. Gegebenenfalls muß eine Tätigkeit im Bereich der Lebensmittelherstellung und verarbeitung ausgesetzt werden 42 IfsG und soma.
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